项目简介
本发明涉及一种新型的蓝白斑筛选系统，该筛选系统主要包括两部分：可组成型表达非核糖体肽合成酶编码基因的大肠杆菌菌株和含有磷酸泛酰巯基乙胺转移酶编码基因的质粒。本发明的筛选系统利用內源合成的色素作为蓝白筛选指示，因此无需添加外源底物和诱导剂，也无需特殊的检测设备，能够快速、简便、经济、高效地完成筛选过程。本筛选系统可以完全代替β-半乳糖苷酶（lacZ）为基础的筛选系统—用于基因片段克隆的筛选。我们以该筛选系统为基础构建了快速制备T载体的重组质粒。
该质粒经过一步限制性内切酶消化可以大量制备T载体。获得的T载体用于PCR产物克隆时，在培养基中无需添加任何显色诱导物或底物，菌落呈现的蓝白两色的颜色区分能够直接锁定目标克隆。
应用领域
利用内源合成的色素作为筛选指示是本系统的特色，类似原理的筛选系统在国内外还属首次报道。适用于生物检测公司，需要具备进行细菌培养、质粒提取和酶切片段回收的常规分子生物学实验室。投资成本100万，预计年回报200万元。
